Завантаження почнеться через 5 секунди. Якщо завантаження не розпочинається натисніть посилання нижче.
Вплив сульфату заліза на стан прооксидантно-антиоксидантної системи у хворих на залізодефіцитну анемію на тлі ревматоїдного артритуВатутин Н.Т. 1, Смирнова А.С. 1, Шевелек А.Н.1, Комарова Е.Б. 2
Резюме. Резюме. У дослідженні проведено порівняльне вивчення рівнів малонового діальдегіду та каталази у осіб із ревматоїдним артритом та залізодефіцитною анемією до початку та після лікування сульфатом заліза. Зроблено висновок про те, що нормалізація рівня гемоглобіну під впливом сульфату заліза супроводжується зниженням активності перекисного окиснення ліпідів, а їх недостатня ефективність асоціюється зі збереженням прооксидантно-антиоксидантного дисбалансу. Резюме. В исследовании проведено сравнительное изучение уровня малонового диальдегида и каталазы у лиц с ревматоидным артритом и железодефицитной анемией до и после лечения сульфатом железа. Сделан вывод о том, что нормализация уровня гемоглобина под влиянием сульфата железа сопровождается снижением активности перекисного окисления липидов, а их недостаточная эффективность ассоциируется с сохранением прооксидантно-антиоксидантного дисбаланса.
Ревматоидный артрит (РА) — хроническое заболевание, характеризующееся развитием воспалительного процесса синовиальной оболочки и формированием костно-деструктивных изменений суставов, в патогенезе которого значительную роль играет активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), дезорганизация антирадикальной защиты и развитие оксидантного стресса (Cheng M.L. et al., 2005; Мікулець Л.В., Волошин О.І., 2011). В свою очередь, оксидантный стресс может приводить к повреждению синовиальных клеток, разрушению хряща и эрозии костной ткани. Железодефицитная анемия (ЖДА), развивающаяся у 30–70% больных РА, также сопровождается активацией процессов свободнорадикального окисления, что усугубляет тяжесть суставного процесса (Коваленко В.М. та співавт., 2010). При этом применение у таких больных препаратов железа, с одной стороны, способствует коррекции анемии, а с другой — может приводить к еще большей активации ПОЛ. Однако состояние прооксидантно-антиоксидантной системы у пациентов с ЖДА на фоне РА и ее изменение на фоне терапии препаратами сульфата железа изучены недостаточно. Цель исследования — изучить влияние сульфата железа на состояние прооксидантно-антиоксидантной системы у больных ЖДА на фоне РА. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯПод наблюдением находились 42 пациентки (средний возраст — 43±9 лет), болеющих РА на протяжении 3–15 лет (9±6 лет). У 24 из них (1-я группа) диагностирована ЖДА (ВОЗ, 2001), остальные (2-я группа) имели нормальный уровень гемоглобина. У 20 (86%) больных была анемия легкой степени тяжести — уровень гемоглобина — 112,8±3,6 г/л (1-я группа), у остальных — средней — уровень гемоглобина — 86,4±2,1 г/л (1б группа). В контрольную группу вошли 20 практически здоровых лиц (женщины 43±8 лет с гемоглобином 137,4±8,2 г/л). Все больные РА принимали метотрексат в средней дозе 9,6±2,4 мг/нед в сочетании с фолиевой кислотой. Стероидные гормоны периодически получали 25 (62,5%), из них в средней дозе — 19,8±6,8 мг/сут (в пересчете на преднизолон). Эпизодически по требованию применяли нестероидные противовоспалительные препараты. Для лечения при ЖДА назначали сульфат железа (при легкой степени тяжести — 60–100 мг/сут элементарного железа, при средней — 200 мг/сут) до нормализации уровня гемоглобина (≥120 г/л), но не более чем на 2 мес (WHO, 2001). После нормализации концентрации гемоглобина проводимую терапию продолжали еще в течение 3 мес в дозе 60–100 мг/сут для восстановления депо железа в организме. Исходно у всех больных и лиц контрольной группы, а также через 2 мес у больных 1-й группы после лечения сульфатом железа определяли уровень продукта ПОЛ — малонового диальдегида (МДА) и фермента антиоксидантной системы (АОС) — каталазы, а также еженедельно регистрировали повышение гемоглобина. Забор крови пациентов для определения общеклинического анализа выполняли натощак из локтевой вены вакутайнером с К2EDTA (1 мг на 1 мл крови). Концентрацию гемоглобина определяли согласно инструкции на автоматическом гематологическом анализаторе «ABX Pentra 80» («Horiba АВХ diagnostics», Франция) с использованием комплекта тест-систем анализатора. Вторичный продукт ПОЛ — МДА определяли спектрофотометрически: 1 мл плазмы крови смешивали с 1 мл 0,6% раствора тиобарбитуровой кислоты в присутствии 1 мл 30% раствора трихлоруксусной кислоты. Затем кипятили 15 мин на водяной бане, охлаждали, центрифугировали 15 мин при скорости 3000 об./мин. После этого образец фотометрировали при λ=532 нм. Расчет содержания МДА выполнялся по формуле: где Е — экстинкция исследуемой пробы. Состояние АОС оценивали по активности каталазы в крови, определяя скорость утилизации перекиси водорода в реакционной смеси, в которую вносили биологический материал (сыворотку крови), содержащий фермент: 0,1 мл сыворотки крови инкубировали с 2 мл 0,03% раствора перекиси водорода в течение 10 мин при температуре 20 ˚С. Затем добавляли 1 мл 4% раствора молибдата аммония, центрифугировали 30 мин при скорости 5000 об./мин. После этого образец фотометрировали при λ=410 нм. Расчет активности каталазы выполняли по формуле:
где ∆Е=Ех–І0, Ех — экстинкция контрольной пробы, Е0 — экстинкция исследуемой пробы, 1332 — коэффициент пересчета. Обеспечение условий для оптимизации сопоставления и воспроизводимости результатов исследования достигали путем взятия крови у всех обследованных натощак, после 12-часового голодания, до еды и приема назначенных лекарственных средств. Обработку результатов исследования выполняли на персональном компьютере с использованием пакета статистического анализа «MedStat». Для проверки распределения на нормальность использовали критерии W Шапиро — Уилка. При нормальном распределении данные приводили в виде среднее ± стандартное отклонение (М±s). Для сравнения средних двух независимых выборок, соответствующих нормальному закону распределения, использовали парный и непарный t-критерии Стьюдента. Корреляционные связи между парами количественных признаков при нормальном их распределении оценивали с помощью коэффициента линейной корреляции Пирсона (r). Во всех случаях проверки гипотез различия считались достоверными при р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
|
Показатель | Исходно | ||
---|---|---|---|
1-я группа | 2-я группа | ||
1а | 1б | ||
МДА, мкмоль/л | 3,8±0,5* | 4,2±0,8 | 3,2±0,2 |
Каталаза, мккат/л | 44,8±6,5* | 40,2±2,8 | 47,4±2,8 |
Различие между: *1а и 2-й группой (р<0,05); 1б и 2-й группой (р<0,05); подгруппами 1а и 1б (р<0,05).
Результаты статистического анализа свидетельствовали о том, что концентрация гемоглобина отрицательно коррелировала с уровнем МДА (r=–0,35; р<0,05) и положительно — с уровнем каталазы (r=+0,32; р<0,05).
Через 2 мес основной терапии у всех больных подгруппы 1а концентрация гемоглобина нормализовалась (124,1±3,7 г/л), что сопровождалось снижением уровня МДА, который стал сопоставим с показателем пациентов 2-й группы, в то время как уровень каталазы не изменился (табл. 2). У пациентов подгруппы 1б уровень гемоглобина не достиг нормы (113,2±5,8 г/л), при этом статистически значимых изменений ни МДА, ни каталазы не произошло.
Показатель | Исходно | После терапии препаратами железа | ||
---|---|---|---|---|
1а группа | 1б группа | 1а группа | 1б группа | |
МДА, мкмоль/л | 3,8±0,5* | 4,2±0,8 | 3,2±0,4* | 4,1±0,6 |
Каталаза, мккат/л | 44,8±6,5 | 40,2±2,8 | 44,4±5,8 | 40,2±2,6 |
*Различие в 1а подгруппе до и после лечения (р<0,05).
Таким образом, результаты проведенного нами исследования свидетельствуют о том, что у больных РА наблюдается активация процессов ПОЛ, особенно при наличии ЖДА, в то время как АОС угнетается. Кроме того, повышение уровня МДА и снижение концентрации каталазы у больных ассоциируется с более высокой степенью тяжести анемии. Вместе с тем, нормализация уровня гемоглобина на фоне применения препаратов железа сопровождается снижением активности ПОЛ, а их недостаточная эффективность ассоциируется с сохранением прооксидантно-антиоксидантного дисбаланса.
Известно, что при гипоксии (в том числе гемической) происходит активация процессов свободнорадикального окисления (Видиборець С.В., 1999). Так, в ряде исследований (Коган А.Х. и соавт., 1991; Дадали Ю.В. и соавт., 2000; Вишівська О.А. та співавт., 2004) у пациентов с ЖДА выявлело повышение уровня МДА и снижение уровней витамина Е, каталазы, глутатионпероксидазы и супероксиддисмутазы. Результаты нашего исследования также показали, что у больных РА и ЖДА происходит значительное усиление процессов ПОЛ и угнетение АОС, прогрессирующее по мере повышения степени тяжести анемии, что подтверждается наличием отрицательной корреляционной связи между уровнями продуктов ПОЛ и гемоглобина. Такая активация ПОЛ, вероятно, связана с тканевой гипоксией, а отсутствие адекватной реакции АОС — с хроническим характером процесса. При этом на фоне нормализации уровня гемоглобина происходит снижение активности ПОЛ, что подтверждается и рядом других исследований (Gurbuz N. et al., 2004; Kamanli A. et al., 2004).
Несмотря на то что сульфат железа является прооксидантом, полученная нами динамика показателей МДА свидетельствует о снижении активности ПОЛ на фоне его приема, что может быть обусловлено нормализацией уровня гемоглобина, которая сопровождается снижением процессов свободнорадикального окисления (Kurtoglu E. et al., 2003; Dyoretskii L.I. et al., 2006).
1. У больных РА отмечается активация ПОЛ и угнетение АОС, которые наиболее выражены при наличии у них ЖДА.
2. Нормализация уровня гемоглобина под влиянием сульфата железа сопровождается снижением активности ПОЛ, а их недостаточная эффективность ассоциируется с сохранением прооксидантно-антиоксидантного дисбаланса.
Адрес для переписки:
Ватутин Николай Тихонович
83003, Донецк, просп. Ильича, 16
Донецкий национальный медицинский
университет им. Максима Горького,
кафедра внутренней медицины № 1
E-mail: a.smyrnova@mail.ru
Leave a comment